Rachael MacFarlane nació en marzo de 1976 en Kent, una pequeña ciudad de Nueva Inglaterra, en el Estado de Connecticut, Estados Unidos.
De ascendencia escocesa, sus ancestros
William Brewster y su esposa
Mary llegaron a los Estados Unidos en el Mayflower. Es hermana del actor
Seth MacFarlane.
Rachael se graduó en el programa de
Teatro Musical del Conservatorio de Boston, y ha desarrollado su carrera, principalmente como artista de voz.
Es mayormente conocida por prestar su voz a distintos personajes de las series "
Family Guy" y "
American Dad!", ambas producidas por su hermano
Seth. En ésta última, interpreta al personaje de
Hayley Smith, además de otros como
Olivia,
Maid Madeline,
Margot Kidder,
Kate Moss y
Minnie Driver.
Otros de sus créditos vocales incluyen las series "
Scooby Doo", "
Static Shock", "
Fillmore", "
Grim & Evil", "
Code Name: Kids Next Door", "
Dexter's Laboratory", "
Powerpuff Girls", "
Samarai Jack", "
Johnny Bravo" y "
Megas XLR"; además de numerosos videojuegos.
Además de prestar su voz a innumerables personajes,
Rachael también se ha involucrado en otros aspectos de la animación, siendo gerenta de producción de las series "
Billy and Mandy" y "
Welcome to Eltingville". Escribió además un episodio de "
Billy and Mandy", titulado "
Educating Grim".
Rachael vive actualmente en Los Angeles.